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原理
細胞周期(Cell Cycle)是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結束所經歷的全過程,細胞的遺傳物質復制并均等地分配給兩個子細胞。細胞周期分為間期與分裂期兩個階段。間期又分為三期:即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期)。某些細胞在分裂結束后暫時離開細胞周期,停止細胞分裂,執行一定生物學功能(G0期)。
流式細胞儀PI染色法檢測細胞周期的原理:由于細胞周期各時相的DNA 含量不同,通常正常細胞的G1/ G0 期具有二倍體細胞的DNA含量(2N) ,而 G2/ M 期具有四倍體細胞的DNA 含量(4N) ,而S期的DNA 含量介于二倍體和四倍體之間。PI(碘化丙啶)為插入性核酸熒光染料,能選擇性嵌入核酸DNA和RNA雙螺旋的堿基之間與之結合,結合量與DNA的含量成正比關系,其熒光強度直接能反映細胞內DNA含量。因此,通過流式細胞儀PI染色法對細胞內DNA含量進行檢測時,可以將細胞周期各時相區分為G1/G0 期,S 期和G2/M 期,獲得的流式直方圖對應的各細胞周期可通過特殊軟件計算各時相的細胞百分率。
樣本要求(需低溫保存運輸):
1)細胞樣本:需為單細胞懸浮狀態,1-3*10的6次方個,細胞狀態良好,活率95%以上,無污染。
2)外周血:24h內采集的EDTA或肝素抗凝全血5ml左右,無對人體有害的病原體污染。
3)新鮮組織:2h內采集的小鼠、大鼠等脾、骨髓、胸腺、淋巴結等新鮮組織大約50mg。
公司交付
實驗原始圖、分析圖和PP
結果展示
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