胰蛋白酶-EDTA (0.25%),含酚紅
貨號:C055-100,C055-500
保存:-5℃至-20℃
胰蛋白酶-EDTA (0.25%),含酚紅 | |
0.25% Trypsin-EDTA Solution(With Phenol Red) | |
產品類型 | 細胞培養解離試劑 |
目錄號 | C055-100,C055-500 |
保存方法 | -5℃至-20℃ |
產品規格 | 100ml,500ml |
螯合劑 | EDTA |
pH 范圍 | 7.2 - 8.0 |
運輸條件 | 濕冰 |
經過測試 | 體外生物檢測 |
數量 | 100mL |
細胞類型 | 哺乳動物 |
形式 | 液體 |
酚紅指示劑 | 酚紅 |
有效期 | 24 個月 |
產品簡介 | 胰蛋白酶(Trypin)是一種絲氨酸水解酶,它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側切段,水解細胞間的蛋白質,破壞細胞間的連接,從而使組織或貼壁細胞離散成單個細胞。胰酶分散細胞的活性與組織或細胞的特性、胰酶濃度、溫度和作用時間有關,在PH 8.0和37℃時,胰酶的作用能力最強,因此使用胰酶時,應把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細胞損傷。 一般常用胰酶的工作濃度為0.25%,而半貼壁細胞或對胰酶敏感的細胞常采用低濃度(0.05%)的胰酶進行細胞消化。由于EDTA能夠螯合Ca2+和Mg2+,從而破壞細胞連接促進細胞的解離,因此在胰酶溶液中常常會加入一定量的EDTA混合使用,以增強解離效果。 |
使用方法 | 1、貼壁細胞的消化: (1)吸除培養液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。 (2)加入少量Trypsin-EDTAsolution,略蓋過細胞即可,室溫放置0.5~2min,不同的細胞消化時間有所不同。 (3)顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的完全細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。 (4)如果發現消化不足,則加入Trypsin-EDTAsolution重新消化。 (5)如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落,直接用胰酶細胞培養液把細胞全部吹打下來。 2、組織的消化: 不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。 |
注意事項 | 1.在使用胰酶細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。 2.胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差。 3.本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。 4.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 |
使用建議 | 1.如果希望消化能力比較強,推薦使用含有 EDTA 的胰酶消化液,消化能力相對更強一些。 2. 如果希望觀察比較方便,推薦選擇含酚紅的胰酶消化液。 3. 對于酚紅可能會干擾后續的測試分析,推薦選擇不含酚紅的胰酶消化液。 4. 對于 EDTA 可能會干擾后續的測試分析時,推薦不含 EDTA 的胰酶消化液。 |